膠原酶ELISA試劑盒(hé)是一種用(yòng)於檢測樣本中(zhōng)膠原酶濃度的試劑盒(hé)，其基於酶聯免疫吸(xī)附試驗（ELISA）原理(lǐ) ，通過特定的抗(kàng)體與(yǔ)膠原酶結合 ，形成抗(kàng)原-抗(kàng)體復(fù)合物 ，進而(ér)通過顯色反應來(lái)定量測定樣本中(zhōng)膠原酶的濃度。

　　膠原酶ELISA試劑盒(hé)的檢測原理(lǐ)主要採用(yòng)雙抗(kàng)體夾心法(fǎ)。在預(yù)先(xiān)包被有膠原酶特異性抗(kàng)體的微孔板中(zhōng) ，加入待測樣本和標準(zhǔn)品 ，樣本中(zhōng)的膠原酶會與(yǔ)包被抗(kàng)體結合 。接著加入辣根過氧(yǎng)化物酶（HRP）標記的檢測抗(kàng)體，形成抗(kàng)體-抗(kàng)原-酶標抗(kàng)體復(fù)合物 。經過洗滌去除未結合的抗(kàng)體後(hòu) ，加入底物TMB進行顯色反應。TMB在HRP的催化下轉化為藍色 ，並在酸的作用(yòng)下轉化為最終的黃色。顏色的深淺與(yǔ)樣本中(zhōng)膠原酶的濃度呈正相關(guān)。最後(hòu) ，用(yòng)酶標儀在450nm波長下測定各孔的吸(xī)光(guāng)度（OD值） ，通過標準(zhǔn)曲線(sī)計算樣本中(zhōng)膠原酶的濃度 。

　　膠原酶ELISA試劑盒(hé)的操作步驟通常包括以下幾個(gè)步驟 ：

　　1 、准(zhǔn)備試劑與(yǔ)樣本：將所有試劑充分混勻 ，避免產生大量泡沫。根據待測樣本數(shù)量加上標準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù) 。

　　2 、加樣 ：在標準(zhǔn)品孔和樣本孔中(zhōng)分別加入不(bù)同濃度的標準(zhǔn)品和待測樣本。注意設置空白孔作為對照。

　　3 、加抗(kàng)體與(yǔ)溫(wēn)育：向各孔中(zhōng)加入辣根過氧(yǎng)化物酶（HRP）標記的檢測抗(kàng)體 ，用(yòng)封板膜封住反應孔 ，進行溫(wēn)育。

　　4、洗滌：棄去液體，用(yòng)洗滌液充分洗滌各孔，以去除未結合的抗(kàng)體。

　　5、顯色 ：向各孔中(zhōng)加入底物A 、B ，進行顯色反應。注意避光(guāng)操作 。

　　6 、終止與(yǔ)測定：加入終止液終止顯色反應，並在規定時間內用(yòng)酶標儀測定各孔的OD值。