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螢光定量PCR試劑盒使用方法(fǎ)

更新時間 :2024-06-26      瀏覽次數:1146

樣品採集:


1、食品樣品 :樣品的(de)採集與預培養按照樣品的(de)採集與預培養按照菌檢驗要(yào)求進(jìn)行。


2、血液樣品 :用無菌注射(shè)器(qì)抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管 ,立即混勻。


3 、糞便樣品:取糞便置於(yú)滅菌的(de)收集管中送檢。


4、病(bìng)灶部位(wèi)樣品:取發病(bìng)部位(wèi)新鮮滲出物、粘液膿血送檢 。


稀釋 PCR 陽性(xìng)對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)

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使用方法(fǎ) :


1. 注意(yì):由於(yú)標準(zhǔn)品濃度非常高,因(yīn)此下列(liè)稀釋操作一定要(yào)在獨立的(de)區(qū)域進(jìn)行 ,千萬不能污染樣品或本試劑盒的(de)其(qí)他成分)。為增加(jiā)產品穩(wěn)定性(xìng)和避免擴散傳染性(xìng)病(bìng)原 ,本產品不提供活體樣品做陽性(xìng)對照 ,只提供可以直接使用的(de) DNA 片段作為陽性(xìng)對照。


2. 標記(jì) 6 個離心管 ,分別為 7,6,5 ,4 ,3 ,2。


3. 用帶芯槍頭分別加(jiā)入 45 μL 螢光 PCR 模板(bǎn)稀釋液(用帶芯槍頭,下同) 。


4. 在 7 號管中加(jiā)入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的(de)陽性(xìng)對照 ,充分震蕩 1 分鐘 ,得1×10E7 拷貝/μL 的(de)陽性(xìng)對照 。放冰上待用。


5. 換槍頭,在 6 號管中加(jiā)入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的(de)陽性(xìng)對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的(de)陽性(xìng)對照。放冰上待用


6. 換槍頭 ,在 5 號管中加(jiā)入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的(de)陽性(xìng)對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘 ,得 1×10E5 拷貝/μL 的(de)陽性(xìng)對照 。放冰上待用 。


7. 重復上面的(de)操作直到得到 6 個稀釋度的(de)陽性(xìng)對照 。放冰上待用 。



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