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佰利萊生物(wù)教您(nín)選購大鼠(shǔ)ELISA試劑盒後需(xū)注(zhù)意哪些

更(gèng)新時間(jiān) :2023-03-28      瀏覽次數:1425
大鼠(shǔ)ELISA試劑盒的(de)基礎(chǔ)是(shì)抗原或抗體的(de)固(gù)相化及抗原或抗體的(de)酶標記。結合(hé)在固(gù)相載體表(biǎo)面的(de)抗原或抗體仍保持其(qí)免疫學活性,酶標記的(de)抗原或抗體既保留(liú)其(qí)免疫學活性 ,又保留(liú)酶的(de)活性 。在測定(dìng)時,受(shòu)檢標本(測定(dìng)其(qí)中的(de)抗體或抗原)與固(gù)相載體表(biǎo)面的(de)抗原或抗體起反(fǎn)應 。用(yòng)洗滌的(de)方法使(shǐ)固(gù)相載體上形成(chéng)的(de)抗原抗體復合(hé)物(wù)與液體中的(de)其(qí)他物(wù)質分開(kāi) 。再加入酶標記的(de)抗原或抗體 ,也通(tōng)過反(fǎn)應而結合(hé)在固(gù)相載體上 。

此時固(gù)相上的(de)酶量(liàng)與標本中受(shòu)檢物(wù)質的(de)量(liàng)呈一定(dìng)的(de)比例(lì) 。加入酶反(fǎn)應的(de)底物(wù)後 ,底物(wù)被酶催化成(chéng)為有色產物(wù) ,產物(wù)的(de)量(liàng)與標本中受(shòu)檢物(wù)質的(de)量(liàng)直(zhí)接相關 ,故可根據(fù)呈色的(de)深淺進(jìn)行(xíng)定(dìng)性或定(dìng)量(liàng)分析(xī)。由於酶的(de)催化效(xiào)率很高(gāo),間(jiān)接地放(fàng)大了(le)免疫反(fǎn)應的(de)結果 ,使(shǐ)測定(dìng)方法達到(dào)很高(gāo)的(de)敏感度 。 ELISA可用(yòng)於測定(dìng)抗原 ,也可用(yòng)於測定(dìng)抗體 。

大鼠(shǔ)ELISA試劑盒選購後需(xū)注(zhù)意哪些:
1.檢查檢查說明書 、包裝盒的(de)質量(liàng),通(tōng)常偽劣產品為了(le)降低成(chéng)本 ,印刷的(de)質量(liàng)會比較差。其(qí)次仔細閱讀說明書,如上所示(shì)查找ELISA的(de)性能指(zhǐ)標 。


2.實驗
(1)利用(yòng)干擾實驗即可鑒別ELISA試劑盒是(shì)否檢測目的(de)抗原a. 將針對試劑盒特異性的(de)重組蛋白抗原和試劑盒中的(de)檢測抗體配置成(chéng)antibody: antigen= 1:2的(de)混合(hé)孵育液;b. 37℃孵育15分鐘後 ,代替原試劑盒中的(de)檢測抗體 ;c. 後續操作(zuò)按照試劑盒說明書進(jìn)行(xíng),加檢測抗體 、酶復合(hé)物(wù)和底物(wù) ;d. 實驗完畢後,檢測其(qí)標準(zhǔn)曲線 ,如果標準(zhǔn)曲線良好則說明加入的(de)目的(de)抗原和試劑盒抗體不匹配,試劑盒檢測抗體針對的(de)是(shì)非目的(de)抗原,該試劑盒為假貨ELISA試劑盒;e. 如果標準(zhǔn)曲線無線性,則說明試劑盒檢測抗體已被目的(de)抗原中和或干擾,影響了(le)其(qí)實際試劑盒抗體的(de)檢測作(zuò)用(yòng) ,則該試劑盒檢測抗體針對的(de)是(shì)目的(de)抗原 。


(2)如果購買了(le)兩盒同(tóng)一公(gōng)司的(de)ELISA試劑盒A和B ,利用(yòng)交叉實驗即可鑒別ELISA試劑盒是(shì)否造假a. 取出購買的(de)試劑盒A的(de)包被板兩條;b. 一條包被板加試劑盒A的(de)標準(zhǔn)品做標準(zhǔn)曲線 ;c. 另一條包被板加試劑盒B的(de)標準(zhǔn)品做標準(zhǔn)曲線 ;d. 後續操作(zuò)按照試劑盒說明書進(jìn)行(xíng) ,加檢測抗體 、酶復合(hé)物(wù)和底物(wù);e. 實驗完畢後 ,檢測兩條標準(zhǔn)曲線,如果兩條標準(zhǔn)曲線一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的(de)同(tóng)一個指(zhǐ)標而非A和B,即該試劑盒為假貨ELISA試劑盒;f. 如果兩條標準(zhǔn)曲線不一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的(de)不同(tóng)指(zhǐ)標,試劑盒A只能檢測A,不能檢測B,即該試劑盒為正常的(de)ELISA試劑盒 。


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